前言
在生物实验中,超滤(Ultrafiltration)是浓缩、脱盐和缓冲液置换的"神兵利器"。但面对0.5mL、2mL、4mL、15mL四种规格,以及2K、3K、10K直到300K七种截留分子量(MWCO),如何精准匹配最适合的超滤管成为实验成功的关键。
规格选择指南
01 体积选择原则
根据样品起始体积和实验通量,锁定超滤管的规格。不同规格的结构设计决定了它们的使用场景
· 0.5mL规格 - 微量珍贵样品
适用场景: 样品极其珍贵、起始体积小(<500μL),且需要高回收率,标准1.5mL/2mL定角转子
操作特点: 采用"浓缩管+收集管"双管设计。离心后需倒置浓缩管,利用低速离心将浓缩液甩入收集管,最大限度减少死体积带来的吸附损失
参考参数: 最终浓缩体积约15-30μL,离心力高达14000xg

· 2mL规格 - 常规离心机适配
适用场景: 兼容15mL锥底离心管的转子或适配器,摆筒和定角转子均适配,常规蛋白浓缩
操作特点: 三件套设计(超滤装置+收液管+滤液管)同样需要倒置回收,适合处理2mL以内的样品,最终体积30-70μL
· 4mL规格 - 中等通量处理
适用场景: 需要处理4mL左右样品,且实验室离心机配备摆桶或定角转子
操作特点: 由“封盖+超滤装置+离心管”组成。无需倒置,直接用移液枪头贴侧壁插入内管底部吸取浓缩液(回收体积80-200μL)。操作比0.5mL和2mL更简便
· 15mL规格 - 大体积制备
适用场景: 大量样品制备,如蛋白质/抗体处理、核酸和病毒浓缩
操作特点:适配大容量离心机。最大上样量可达15mL(摆桶)或12mL(定角),回收体积150-300μL。同样采用直接吸取的方式回收,注意:吸取时避免刮伤膜表面。
精度选择指南
01 截留分子量(MWCO)选择原则
黄金法则: 为了获得最佳截留效果,建议使用MWCO比要浓缩的溶质分子量小两倍至三倍的滤膜
02 应用选型速查表
· 蛋白质类应用选型表
*适用于抗体、酶、抗原等样品的浓缩与换液
目标蛋白分子量 | 推荐滤膜规格(MWCO) | 适用场景说明 |
< 20 kDa | 3K 或 2K | 小分子蛋白 多肽 标记物 (如Lysozyme) |
20 - 60 kDa | 10K | 中等分子量蛋白,常规纯化 |
60 - 100 kDa | 30K | 较大分子量蛋白 (如BSA) |
100 - 200 kDa | 50K | 大分子蛋白复合物 |
200 - 500 kDa | 100K | 抗体IgG、大分子聚合物 |
> 600 kDa | 300K | 巨大分子蛋白、病毒颗粒 |
· 核酸类应用选型表
*适用于DNA、RNA、质粒的浓缩与脱盐
核酸类型 | 分子量估算参考 | 推荐滤膜规格 |
寡核苷酸 / 引物 | 小分子 | 3K |
PCR产物 (双链) | 100bp - 1kb | 10K/100K |
质粒 DNA | >2kb | 100K/300K |
基因组 DNA | 极大分子 | 300K |
特殊应用推荐
脱盐与缓冲液置换: 推荐使用 3K, 10K, 30K。利用小分子盐透过膜,大分子蛋白被截留的原理。
病毒浓缩/去除: 推荐使用100K或300K。用于从细胞裂解液中分离病毒颗粒。
去除引物/接头: 推荐使用30K或50K。用于分子生物学反应后的纯化,去除小片段杂质。
实验注意事项
· 操作禁忌
超滤膜一旦润湿,必须保持湿润状态,直到使用完毕。
· 离心力控制
1- 0.5mL规格耐受力最强(最高14000xg)
2- 4mL和15mL规格在使用100K和300K大孔径滤膜时,离心力需适当降低(如100K建议≤3000xg),以免损坏膜结构。
· 化学兼容性
Briscale™系列对常见的缓冲液、8M尿素、6M盐酸胍、70%乙醇等均有良好的兼容性,但若使用DMSO等试剂建议接触时间控制在2小时内。
